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Il progetto dal titolo “Functional characterization of Transportin 3 in myogenic differentiation in cellular and animal models (Zebrafish) of Limb Girdle Muscular Dystrophy 1F/D2” (“Caratterizzazione funzionale della Transportina 3 nel differenziamento miogenico in modelli cellulari e animali (Zebrafish) della Distrofia Muscolare dei Cingoli 1F/2D”) si svolgerà nel 2022 e ha come obiettivo la generazione di un modello animale, mediante Danio Rerio o pesce zebra (zebrafish), e cellulare in grado di mimare la malattia per poter chiarire il ruolo funzionale della TNPO3 nella patogenesi muscolare della LGMD1F/D2 . Colmare questa lacuna di conoscenza aiuterà anche lo sviluppo di specifiche strategie terapeutiche che ad oggi mancano.
Un ulteriore obiettivo del progetto i è quello di mettere a punto il silenziamento stabile del gene responsabile della LGMDD2 tramite il sistema CRISPR-CAS9. La linea cellulare C2C12 e le linee di controllo (HeLa), sono state sottoposte ad editing genetico mediante questa tecnica per ottenere il silenziamento genico (gene knockdown) che verrà valutato, dopo la selezione dei cloni cellulari ottenuti, con analisi genetiche e molecolari.
Riuscire a raggiungere entrambi gli obiettivi del progetto ci permetterà di ottenere modelli validi di studio di questa malattia anche per una valutazione del possibile coinvolgimento di altre proteine nel pathway della TNPO3 e, quindi, nel meccanismo patogenetico delle alterazioni muscolari specifiche della LGMDD2.
Il progetto dal titolo “Functional characterization of Transportin 3 in myogenic differentiation in cellular and animal models (Zebrafish) of Limb Girdle Muscular Dystrophy 1F/D2” (“Caratterizzazione funzionale della Transportina 3 nel differenziamento miogenico in modelli cellulari e animali (Zebrafish) della Distrofia Muscolare dei Cingoli 1F/2D”) si svolgerà nel 2022 e ha come obiettivo la generazione di un modello animale, mediante Danio Rerio o pesce zebra (zebrafish), e cellulare in grado di mimare la malattia per poter chiarire il ruolo funzionale della TNPO3 nella patogenesi muscolare della LGMD1F/D2 . Colmare questa lacuna di conoscenza aiuterà anche lo sviluppo di specifiche strategie terapeutiche che ad oggi mancano.
Un ulteriore obiettivo del progetto i è quello di mettere a punto il silenziamento stabile del gene responsabile della LGMDD2 tramite il sistema CRISPR-CAS9. La linea cellulare C2C12 e le linee di controllo (HeLa), sono state sottoposte ad editing genetico mediante questa tecnica per ottenere il silenziamento genico (gene knockdown) che verrà valutato, dopo la selezione dei cloni cellulari ottenuti, con analisi genetiche e molecolari.
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